北京白癜风手术费用 http://pf.39.net/bdfyy/职称考试事半功倍的四步法
文
炜墨
还有两个月职称就要到职称考试的时间了,你是不是也有下面这样的感觉呢?
学了一两个月了,做题还是什么都不会。
看书的时候不知道该看什么,感觉哪里都是重点,哪里都需要记。
一直在看题,感觉什么都不会,不看答案就不知道该选什么。
小编在这里给大家分享一个靠谱的学习方法:四步法。
先说一下准备的东西吧,需要买一本辅导书,一到两套模拟题(每门0份试卷左右),如果能找到历年真题最好了。
第一步:粗略看题
这一步一般用时三天左右。
本阶段主要任务是:把买来的试卷粗略的看一下,不用做题,只需要大致知道什么知识点考的比较多,出现的频率比较大,记下这些出现频率比较大的知识点。比如免疫学检验部分的补体,超敏反应;临床检验基础里面的胸腹水,血涂片;血液学检验里面的白血病分型,瀑布学说等知识这都是出现频率比较大考试可能遇到的。
第二步:粗略看书
这一阶段一般用时半个月到一个月。
本阶段主要任务是:把书快速地看一遍,对书上的知识有一些印象,并且重点记一下上一步罗列出来考试比较多的知识点。
这一步主要是给后续的几步打基础,一定要认真地把书看完,该记的记住,这样下一步看题的时候,即使不知道问题的答案也能知道这个知识点属于哪一类,在书的什么位置。比较容易混淆的知识,比如心肌标志物出现的时间,可以写在小纸条上,上班闲下来的时候翻一翻。
第三步:精细做题
这一阶段一般用时一个月左右,本阶段是所有步骤中最主要最关键的阶段,前面两个阶段都是给这一阶段打基础,后面的那一个阶段也是为了完善这一阶段的学习。
本阶段主要任务是把买来的那些题做一遍,记下什么题自己做错了,什么知识点掌握的不够牢固,什么知识点记的混淆了,把这些东西记到一个本上,有时间了就翻一翻。
第四步:查缺补漏
四步法执行到这一阶段的时候一般就到五月份,离考试没有几天了,这一阶段主要任务是:巩固第三步中遇到的知识点,翻看错题,看什么知识自己记住又忘了,什么知识记得混淆了,什么知识还没有记住。
结束语
职称考试复习每个人都有自己的学习方法,有的人喜欢看视频,有的人喜欢看书,有的人喜欢做题,有的人喜欢书和题一起看(四步法就是这一类)。还有两个月的时间就要考试了,不管用什么方法都需要付出很大的努力。付出与回报成正比,你付出多少,就能得到多少。
知识点整理(一)粒细胞系统.原始粒细胞(myeloblast):0~8μm,胞体圆或类圆形,核占细胞的2/3以上,居中或略偏位,核染色质呈细颗粒状排列均匀,核仁2~5个、较小、清楚;胞浆量少,染天蓝色,有透明感,无颗粒。2.早幼粒细胞(promyelocyte):2~20μm,较原粒细胞大,核染色质较原粒细胞粗糙,染色质颗粒开始有聚集,核仁可见或消失;胞浆染淡蓝色、蓝色或深蓝色,含大小不等、形态不一的紫红色颗粒(即非特异性颗粒)。3.中幼粒细胞(myelocyte)①中性中幼粒(neutrophilicmyelocyte):0~8μm,胞核椭圆形或一侧开始扁平,可有凹陷,其凹陷处约占细胞的2/3~/2,核染色质聚集呈索块状,核仁隐约可见或消失;胞浆量多,染淡红或少数区域略偏蓝,含大小一致的红色颗粒、即特异性颗粒(致少有一个区域)。②嗜酸性中幼粒(eosinophilic):5~20μm:核与中性中幼粒相似;胞浆内充满粗大而均匀、排列紧密的橘红色特异性嗜酸性颗粒。③嗜碱性中幼粒(basphilic):0~5μm,核圆形或椭圆形、但常常轮廓不清,核染色质较模糊;胞浆内及核上含有排列零乱、大小不等数量不多的紫黑色嗜碱性颗粒。4、晚幼粒细胞(metamyelocyte)①中性晚幼粒(neutropilicmetamyelocyte):0~6μm,核明显凹陷呈肾形,马蹄形,半月形,但其核凹陷程度不超过假设直径的一半,核染色质粗糙,排列更紧密,无核仁;胞浆量多,浅红色,充满中性特异性颗粒。②嗜酸性晚幼粒(eosinophilicmetamyelocyte):0~6μm,核形及结构与中性晚幼粒相似;胞浆内充满橘红色的、大小一致的嗜酸性特异性颗粒。③嗜碱性晚幼粒(basophilicmetamyelocyte):0~4μm,核固缩呈肾形,轮廓模糊;胞浆内及核上分布有少量嗜碱性非特异颗粒。5.杆状核粒细胞(stabgranulocyte)①中性杆状核粒细胞(neutrophilicstabgranulocyte):0~5μm,核凹陷程度超过假设直径的一半,核径最窄处大于最宽处/3以上,呈带状弯曲,核染色质粗糙呈块状;胞浆充满中性颗粒。②嗜酸性杆状核粒细胞(eosinophilicstabgranulocyte):~6μm,核与中性杆状相似;浆内充满嗜酸性颗粒。③嗜碱性杆状核粒细胞(basophilicstabgranulocyte):0~2μm,核呈模糊杆状;胞浆内及核上分布有少量嗜碱性颗粒。6.分叶核粒细胞(segmentedgranulocyte)①中性分叶核粒细胞(neutrophilicsegmentedgranulocyte):0~4μm,核呈分叶状,叶与叶之间有细丝相连或全断开,常分2~5叶,核染色质已浓集呈粗的小块状,染深紫红色;胞浆丰富,内含淡红色均匀细小颗粒。②嗜酸性分叶核粒细胞((eosinophilicsegmentedgranulocyte):~6μm,核多分2叶,核染色质结构与中性分叶核相似;胞浆内充满粗大均匀一致的橘红色嗜酸性颗粒。③嗜碱性分叶核粒细胞(basophilicsegmentedgranulocyte):0~2μm,核可分3~4叶或分叶不明显;胞浆分布有少量大小不等的紫黑色嗜碱性颗粒。(二)红细胞系统①原始红细胞(pronormoblast):5~20μm,呈圆形或椭圆形,边缘常呈钝角状或瘤状突起,核呈圆形,居中或偏位,约占细胞体的4/5左右,核染色质呈颗粒状较原粒细胞粗而密集,核仁~3个不等,且大小不一,形状不规则,呈浅蓝色或暗蓝色;胞浆量少,染深蓝色、不透明,有油画蓝感,无颗粒。②早幼红细胞(earlynormoblast):0~8μm,核圆形或椭圆形,约占细胞的2/3以上,核染色质颗粒有浓集现象,较原红细胞粗糙,核仁模糊或消失;胞浆量增多,染不透明蓝色或深蓝色,边缘可见瘤状突起。③中幼红细胞(polychromaticnormoblast):8~5μm,核圆形,约占细胞的/2,核染色质凝聚呈条索状或块状,中间有明显空隙,如压碎饼干样或打碎墨砚感,无核仁;胞浆量相对较多,浆内由于已合成不等量的血红蛋白,可染呈不同程度的嗜多色性。④晚幼红细胞(orthochromaticnormoblast):7~0μm,核圆形居中或偏位,占细胞的/2以下,核染色质致密聚集成结构不清的紫黑色团块状,无核仁;胞浆量较多,因已合成大量血红蛋白,常染浅灰红色或浅红色。⑤网织红细胞(reticulocyte):7.2~7.5μm,为晚幼红细胞刚脱核而成,是尚未完全成熟的红细胞,瑞氏染色为多嗜性红细胞,用煌焦油蓝活体染色后在细胞内可见蓝色细颗粒或呈线状或网状结构。⑥红细胞(erythrocyte):正常红细胞平均为7.2μm,呈双面微凹之圆盘状,中央较薄,染色浅,边缘较厚,染色深,呈粉红色,无核。(三)单核细胞系统①原始单核细胞(monoblast):5~20μm,胞体圆形或椭圆形,核较大圆形或类圆形,核染色质纤细,呈疏松网状结构,核仁~3个;胞浆量较其它原始细胞丰富,灰蓝色,不透明,边缘不规则或有伪足状突起。②幼稚单核细胞(promonocyte):5~25μm,核圆形或不规则形,易见扭曲、凹陷、切迹等改变,核染色质较原始单核细胞粗糙疏松,核仁可有可无;胞浆浅灰蓝色,不透明,可见细小颗粒。③单核细胞(monocyte):2~20μm,核形态常不规则,有肾形,马蹄形,“S”形,分叶状,笔架形等,核染色质疏松呈丝网状或条纹状结构,无核仁;胞浆量较多,染不透明的灰蓝色,可见细小红色颗粒。(四)淋巴细胞系统.原始淋巴细胞(lymphoblast):0~8μm,胞体圆形或椭圆形,核呈圆形或椭圆形,核染色质呈细颗粒状,核仁~2个;胞浆量少,呈淡蓝色,透明,无颗粒。2.幼稚淋巴细胞(prolymphocyte):0~6μm,核圆形或椭圆形,核染色质仍较细致,核仁可有可无;胞浆量较少,淡蓝色,偶见有少许红色颗粒。3.淋巴细胞(lymphocyte)①大淋巴细胞:2~5μm,核圆形稍偏于一侧,核染色质排列紧密均匀,深紫红色;胞浆量相对较多,染透明淡蓝色,可有少量大小不等的红色嗜天青颗粒。②小淋巴细胞:6~9μm,核相对较小,呈圆形,核染色质紧密呈大块状,结构不清楚,染深紫红色;胞浆极少,似裸核样,如可见则呈淡蓝色,一般无颗粒。(五)浆细胞系统.原始浆细胞(plasmablast):4~8μm,胞体圆形或椭圆形,核圆形,占细胞的2/3以上,居中或偏位,核染色质呈粗颗粒网状,染紫红色,核仁2~5个;胞浆量多,染深蓝色,不透明,无颗粒。2.幼稚浆细胞(proplasmacyte):2~6μm,胞体多呈椭圆形,核圆形或椭圆形,占细胞的/2,居中或偏位,核染色质较原浆细胞粗糙紧密,开始聚集,染深紫红色,核仁模糊或消失;胞浆量多,深蓝色或紫蓝色或呈蓝色火焰状,不透明,有时可有空泡及少数嗜天青颗粒。3.浆细胞(plasmacyte):8~5μm,核明显缩小,圆形,占细胞的/3以下,偏于一侧,核染色质浓集成块状,常排列呈车轮状,无核仁;胞浆量丰富,染蓝色或紫蓝色,不透明,有时有泡沫感,浆内可含有小空泡及/或少量嗜天青颗粒,偶见胞浆中有较大的红色或淡蓝色透明的球状物,称Russell小体,是球蛋白聚集而成。(六)巨核细胞系统.原始巨核细胞(megakaryoblast):5~30μm,胞体圆形或不规则形,核大,呈圆形或不规则形,核染色质较其他原始细胞粗,呈粗网状或细条索状结构,染深紫红色,核仁2~3个,淡蓝色,不清晰,不规则;胞浆量较少,不均匀,不规则,染深蓝色,无颗粒。2.幼稚巨核细胞(promegkaryocyte):30~50μm,外形不规则,核亦不规则,有重叠,可扭转呈肾形或分叶状,核染色质呈粗颗粒或粗网状或局部浓集呈小块状,排列紧密,核仁可有可无;胞浆量增多,常有伪足状突出,染蓝色或浅蓝色,在近核处出现或多或少的很细小红色嗜天青颗粒。3.巨核细胞(megakarycyte)①颗粒型巨核细胞:40~70μm,可达00μm,外形不规则,核较大,形态不规则,多呈分叶状,核染色质较粗糙,排列紧密呈团块状,紫红色,无核仁;胞浆量丰富,染粉红色,夹杂有蓝色,内含大量细小红色颗粒,常聚集呈簇,但无血小板形成。②产板型巨核细胞:40~70μm,可达00μm,形态大致与颗粒型巨核细胞相似,唯有不同的一点是胞浆内充满细小的红色颗粒及数量不等的血小板。③裸核型巨核细胞:是产板型巨核细胞的胞浆解体后,释放出大量血小板,仅剩一个细胞核,称之为裸核。4.血小板(platelet):胞体很小,2~4μm,呈圆形、椭圆形,逗点状,不规则形,中心部位有细小紫红色颗粒,无细胞核,涂片上血小板常三五成群堆集出现。(七)其他细胞.组织嗜细胞(tissuebasophiliccell):又称肥大细胞(mastcell),2~20μm,呈圆形,椭圆形,梭形,三角形等,核小,呈圆形或椭圆形,居中或偏位,核染色质模糊,结构不清;胞浆充满圆形、大小一致的深紫色嗜碱性颗粒。2.内皮细胞(endothelialcell):8~22μm,形态极不规则,多呈梭形,核呈圆形或椭圆形,核染色质呈网状,多无核仁;胞浆量少,染淡蓝色,边缘常模糊不清,常沿核长轴的两侧或一端呈尾状伸出,可有细小紫红色颗粒。3.纤维细胞(fibrocyte):胞体较大,不规则,多为长尾形,核圆形或椭圆形(~数个),核染色质呈或细或粗的网状结构,核仁~2个,不清晰,成熟者无核仁;胞浆丰富,多在细胞两端,染淡蓝色,边界模糊,内含纤维网状物及少许嗜天青颗粒。4.成骨细胞(osteoblast):胞体较大,20~40μm,长椭圆形或不规则形,单个或多个成群分布,核圆形或椭圆形,常偏于细胞一侧,核染色质排列呈粗网状,染深紫红色,核仁可有~3个;胞浆丰富,染深蓝色或灰蓝色,边缘常呈模糊云雾状。5.破骨细胞(osteoclast):胞体巨大,60~00μm,形态不规则,颇象巨核细胞,核小、数量较多,3~00个不等,圆形或椭圆形,大小大致相等,边缘清晰,彼此独立,无核丝相连,随意排列,核染色质呈粗网状,几乎每个核都有一个蓝色核仁;胞浆丰富,染淡蓝色或浅红色,含大小不等的紫红细小颗粒。6.脂肪细胞(fattycell):30~50μm,胞体圆形或椭圆形,核较小,形状不规则,常被挤压在一边,核染色质呈细致密网状,无核仁;胞浆内充满大量空泡。7.组织细胞(histiocyte):胞体较大,20~50μm,形态多样,一般呈圆形或椭圆形及不规则形,核可有圆形,椭圆形,肾形,核染色质呈疏松网状结构,核仁2~4个不等;胞浆多少不一,染色也常不一致,有深蓝,淡蓝,灰蓝色等,边缘多不规则或不清楚,无颗粒或含有少量或细或粗或粗细不一的嗜天青颗粒,可有空泡或含异物等。8.吞噬细胞(phagocyte):不是一种独立的细胞,而是胞浆内含有吞噬物质的一组细胞的总称。具有吞噬功能的细胞有单核细胞、组织细胞、血管内皮细胞,纤维细胞等。吞噬细胞的形态极不一致,由吞噬物的类型及吞噬物的多少而定。其胞核圆形、椭圆形或不规则形,常一个核,有时为双核,核常被挤压至一侧,核染色质较疏松,核仁可有可无。胞浆多少不一,淡蓝色或淡红色,常有空泡,并有数量不等的吞噬物,吞噬物有空泡、色素、颗粒、有核细胞、红细胞、血小板、碳核、细菌等。有时吞噬细胞成堆存在。
第二节异常血细胞形态学
(一)粒细胞系统形态异常.白血病时粒细胞改变①胞体:大小不等、畸形。②胞浆:Auer小体,颗粒粗大、增多。Auer小体:是在细胞浆内出现结构均匀一致的红色细棒状小体。产生原因是嗜天青颗粒融合而成。常见于急性非淋巴细胞性白血病细胞浆内。③胞核:畸形、切迹、折叠、凹陷、扭曲、分叶等。如急淋时核易破碎,核分裂象增多。④核浆比:增大、发育不平衡(M2b)。⑤核仁:大、数量增多、亦可不清楚。2.巨大粒细胞:可见于中、晚、杆、分阶段。常见巨晚幼、巨杆状。①形态特征:与同期相比,胞体大、核大、核染色质较同阶段细胞细致。②形成原因:核酸代谢障碍。③常见疾病:巨幼贫、M6、MDS、M2b、抗叶酸类药物治疗后。3.中性粒细胞分叶过多:分5叶以上,常见于巨幼贫、严重感染恢复期。4.粒细胞中毒变性改变①中毒颗粒:胞浆颗粒大小不等、分布不均、染紫黑色或深紫红色。见于严重感染、大面积烧伤等。②空泡:浆或核内空泡。见于严重感染。③杜勒小体(Dohle):蓝斑,在细胞浆内直径约~2μm的蓝色区域。见于严重感染,肝硬化等。④核变性:核固缩、核肿胀、核碎裂、核溶解。见于严重感染。(二)红细胞系形态异常.巨幼红细胞①形态特征:与同期细胞相比,胞体大、核大、核染色质细致、排列疏松“幼核老浆”。②产生原因:核酸代谢障碍。③常见疾病:巨幼贫、M6、MDS、抗叶酸治疗后等。2.低色素性红细胞①形态特征:与同期细胞相比,浆量少、嗜碱性、着色偏蓝,核染色质无明显异常改变“幼浆老核”。成熟红细胞中心淡染区明显扩大。②产生原因:Hb合成障碍(不能说缺铁)。③常见疾病:IDA、Hb病、慢性感染性贫血等。3.红细胞大小不等、形态不整:见于各种增生性贫血。4.球形红细胞:<6.4μm,中心淡染区明显缩小或消失。见于遗传性球形红细胞增多症。5.椭圆形红细胞:横径/长径<0.78。见于遗传性椭圆形红细胞增多症。6.靶形红细胞:见于低色素性贫血、地贫等。7.嗜多色性红细胞:成熟红细胞染灰蓝色或浅灰色。多表示骨髓造血功能活跃,多见于溶贫、失血性贫血等。8.嗜碱性点彩红细胞:瑞氏染色后在红细胞浆中有蓝黑色细小颗粒存在。表示骨髓再生加速。铅中毒时多见。9.裂红细胞:即红细胞碎片。可见于微血管病性溶贫、DIC及损伤性。0.红细胞中出现异常结构①豪-周小体(Howoll-Jolly,s):属核残余物。可见于巨幼贫、溶贫、脾切除后、铅中毒等。②卡波环(Cabot,sring):可见于铅中毒、巨幼贫等。(三)淋巴细胞形态异常.异型淋巴细胞:分浆细胞型、单核细胞、幼稚型。可见于出血热、传单及其它病毒感染。2.原、幼淋巴细胞:淋巴细胞白血病、淋巴瘤等。(四)单核-巨噬细胞系统形态异常.恶组:多形性、多核异组。2.急单、类单核细胞白血病反应等。3.戈谢细胞(Gaucher):戈谢病。4.尼曼-皮克细胞(Niemann-pick):尼曼-皮克病。(五)巨核细胞系统形态异常.幼巨产板:ITP。2.小巨核:大小与成熟淋巴细胞相似,形态不规则,有伪足突起,核染色质浓集,无明核仁。可见于白血病、MDS等。3.巨大血小板:见于巨大血小板综合症。
知识点整理血液样本采集和血涂片制备
血液由红细胞,白细胞,血小板和血浆组成。
2离体后的血液自然凝固,分离出来的淡黄色透明液体称为血清
3血清与血浆的区别是血清缺少某些凝血因子
4血清适用于临床化学和临床免疫学检查
5正常人血量约为(70土0ml)/kg体重,成人4~5L,占体重的6%~8%,其中血浆占55%,血细胞占45%
6血液的红色来自红细胞内血红蛋白,动脉血氧合血红蛋白含量较高,呈鲜红色,静脉血还原血红蛋白含量高,呈暗红色
7严重一氧化碳中毒或氰化物中毒者血液呈樱红色
8正常人血液ph值的波动范围是7.35~7.45
9正常男性的血液比密为.~.,女性为.05~.,相对黏度为4~5,血浆比密为.~.,血细胞比密为.。血液比密与红细胞含量,红细胞内血红蛋白含量有关。血浆比密和血浆内蛋白浓度有关
0血液具有红细胞的悬浮稳定性,粘滞性,凝固性这三种特性
正常人的血浆黏度约为生理盐水黏度的.6倍
2血液黏度与血细胞比容,血浆黏度有关
3血液生理功能包括:运输功能,协调功能,维护集体内环境稳定和防御功能
4静脉血通常使用的采血部位是肘部静脉,手背静脉,内踝静脉,股静脉
5在静脉采血时为了避免血小板激活,常使用塑料注射器和硅化处理后的试管或者塑料管
6世界卫生组织(who)推荐采集左手无名指指端内侧血液,婴幼儿可采集拇趾或足跟内外侧缘血液,严重烧伤患者可选择皮肤完整处采血
7彩色真空定量采血用于葡萄糖,糖耐量测试,添加的抗凝剂是氟化钠
8彩色真空管定量采血用于血培养,应添加的抗凝剂是多聚茴香脑硫酸钠
9皮肤采血法的缺点是易于溶血,凝血,混入组织液,而且局部皮肤揉擦,针刺深度不一,个体皮肤厚度差异等都影响检查结果,所以,皮肤采血检查结果重复性差,准确性不好
20采血方法应在患者,采血,溶血,样本处理,实验结果分析等方面进行质量控制
2乙二胺四乙酸盐能与血液中钙离子结合成螯合物,使钙离子失去凝血作用,组织血液凝固
22EDTA盐对血细胞形态,血小板计数影响很小,适用于血液学检查,尤其是血小板计数
23草酸盐的优点是溶解度好,价廉
24肝素可加强抗凝血酶灭活丝氨酸蛋白酶作用,阻止凝血酶的形成,并阻止血小板聚集等作用,从而阻止血液凝固
25枸橼酸钠能与血液中钙离子结合成螯合物,枸橼酸钠与血液的抗凝比例为:9或:4
26采用手工推片法制备血涂片时,通常推片与载玻片保持25~30度角
27采用厚血膜涂片法制备血涂片时,载玻片中央置血滴,用推片将血由内向外旋转涂成厚薄均匀,直径约.5cm的圆形血膜,待干后,加蒸馏水使红细胞溶解,再干后染色镜检
28将适量伊红,亚甲基蓝溶解在甲醇中,即为瑞氏染料
29瑞氏染色法是最经典,最常用的染色法,尤其对于细胞质成分,中性颗粒等可获很好的染色效果,但对细胞核的着色能力略差
30血液制备涂片时,血滴越大,角度越大,推片速度越快,血膜越厚,反之则越薄
红细胞检查
血液中数量最多的有形成分是红细胞,起源于骨髓造血干细胞
2晚幼红细胞通过脱核成为网织红细胞,这一过程在骨髓中进行,约需72h
3网织红细胞经约48h成完全成熟的红细胞,释放入血液,平均寿命20d,衰老红细胞主要在脾破坏,分解为铁,珠蛋白和胆红素
4红细胞生理功能是通过胞内的血红蛋白来实现的,红细胞有交换和携带气体的功能
5血红蛋白分子由亚铁血红素和珠蛋白构成
6血红蛋白分子是一种微红色的胶体物质,是一种呼吸载体,每克血红蛋白可携带.34ml氧
7新生儿由于出生前处于生理性缺氧状态,故红细胞明显增高,较成人约增加35%,出生2周后逐渐下降,2个月婴儿约减少30%
8真性红细胞增多症,良性家族性红细胞增多症等能引起原发性红细胞增多
9房室间隔缺损,法洛四联症等先天性心血管疾病可引起继发性红细胞增多
0呕吐,严重腹泻,多汗,多尿,大面积烧伤,晚期消化道肿瘤而长期不能进食等均可引起相对性红细胞增多
改良牛鲍计数板用优质厚玻璃制成,每块计数板分为两个计数池,计数池两侧各有一条支持柱,将特制的专用盖玻片覆盖其上,形成高0.0mm的计数池
2红细胞计数采用的盖玻片是专用的玻璃盖片,要求表面平整光滑,两面平整度在0.mm以内,盖玻片规格是24mm*20mm*0.6mm
3红细胞计数时需遵循一定方向逐格进行,以免重复或遗漏,对压线细胞采用数左不数右,数上不数下的原则
4Heyem红细胞稀释液中,Nacl具有调节渗透压的作用
5枸橼酸钠稀释液中,枸橼酸钠具有抗凝和维持渗透压的作用
6枸橼酸钠稀释液中,甲醛具有防腐和固定红细胞的作用
7血液中血红蛋白采用比色法测定
8血液中除硫化血红蛋白外的各种血红蛋白均可被高铁氰化钾氧化为高铁血红蛋白。
9正常成年男性Hb含量参考值为20~70g/L,女性为0~50g/L,新生儿70~g/L
20正常情况下,红细胞和血红蛋白量有日内波动,上午7时达高峰,随后下降
2发生大细胞性贫血或小细胞低色素性贫血时,红细胞计数与血红蛋白浓度不成比例。大细胞性贫血的血红蛋白浓度相对偏高
22小红细胞低色素贫血时血红蛋白减低
23红细胞形态检查与血红蛋白测定,红细胞计数结果相结合可粗略推断贫血原因、
24小红细胞见于缺铁性贫血,珠蛋白生成障碍性贫血,遗传性球形细胞增多症
25巨红细胞见于叶酸及维生素B2缺乏所致的巨幼细胞性贫血
26高色素性红细胞见于巨幼细胞性贫血
27同一血涂片同时出现低色素,正常色素性两种细胞,又称双形性贫血,见于铁粒幼红细胞性贫血
28球形红细胞中央着色深,体积小,直径与厚度比小于2.4:.见于遗传性和获得性球形细胞增多症和小儿
29靶形红细胞见于各种低色素性贫血,阻塞性黄疸,脾切除后
30口形红细胞见于口形红细胞增多症,小儿消化系统疾患引起的贫血,酒精中毒,某些溶血性贫血,肝病和正常人
3瑞氏染色后,胞质内出现形态不一的蓝色颗粒(变行RNA),属于未完全成熟红细胞,颗粒大小不一,多少不等,称嗜碱性点彩红细胞,见于铅中毒,正常人
32成熟性红细胞或幼红细胞胞质内含有一个或多个暗紫红色圆形小体,称为聚焦小体,为核碎裂,溶解后的残余部分
33英文缩写HCT表示血细胞比容,也可以写作Hct,Ht,PCV
34血细胞比容是指在一定条件下,经离心沉淀压紧的红细胞在全血样本中所占比值
35红细胞平均血红蛋白含量(MCH)是指每个红细胞内平均所含血红蛋白的量,以皮克(pg)为单位
36红细胞平均血红蛋白浓度(MCHC),即平均每升红细胞中所含血红蛋白的浓度,以g/l为单位
37红细胞凝集,严重高血糖症可使MCV假性增高
38魏氏法测定血沉,抗凝剂(枸橼酸钠)与血液的比例是:4
白细胞检查
粒细胞起源于造血干细胞,在高浓度集落刺激因子作用下粒系祖母细胞分化为原粒细胞,经数次有丝分裂,依次发育为早幼粒,中幼粒,晚幼粒,杆状核和分叶核粒细胞
2一个原粒细胞经过增殖发育,最终生成8~32个分叶核粒细胞。此过程在骨髓中约需0d,成熟粒细胞进入血液后仅存6~0h,然后逸出血管进入组织或体腔内
3粒细胞在组织中可行驶防御功能~2d,衰老的粒细胞主要在单核-巨噬细胞系统破坏,其余从口腔,气管,消化道,泌尿生殖道排出,同时,骨髓释放新生的粒细胞补充周围血而保持白细胞数量相对稳定
4分裂池包括原粒细胞,早幼粒细胞和中幼粒细胞,能合成DNA,具有分裂能力
5进入外周血的成熟粒细胞有一半随血液而循环,白细胞计数值就是循环池的粒细胞计数
6嗜酸性粒细胞能释放组胺酶
7嗜碱性粒细胞内的颗粒含有组胺,肝素,过敏性慢反应物质,嗜酸性粒细胞趋化因子,血小板活化因子
8嗜碱性粒细胞在整个生理功能中突出的特点是参与过敏反应
9单核-巨噬细胞具有吞噬病原体功能,吞噬和清理功能,吞噬抗原传递免疫信息功能,还参与杀菌,免疫和抗肿瘤作用
0淋巴细胞源于骨髓造血干细胞/祖细胞,是人体主要免疫活性细胞,约占白细胞总数的/4
B淋巴细胞可经抗原激活后分化为浆细胞,产生特异抗体,参与体液免疫
2在胸腺,脾,淋巴结和其他淋巴组织,依赖胸腺素发育成熟者称为T淋巴细胞
3正常情况下,外周血中不会出现有核红细胞,若出现大量该细胞,其不能被白细胞稀释液破坏
4血液检验中,白细胞计数指标参考值无性别差异
5正常人外周血涂片白细胞分类中,中性粒细胞所占比例为50%~70%,其增高和减低直接影响白细胞总数变化
6采用显微镜计数法进行白细胞计数时,通常吸取白细胞稀释液0.38ml于小试管中
7正常血涂片白细胞分类计数,嗜酸性粒细胞占.5%~5%
8正常中性分叶核粒细胞中以3叶核居多
9感染,理化损伤,血液病,脾功能亢进,免疫性疾病可见中性粒细胞减低
20中性粒细胞核左移是指外周血杆状核粒细胞增多,出现晚幼粒,中幼粒,早幼粒,原幼粒等细胞
2再生性左移是指核左移伴有白细胞总数增高者,表示机体反应性强,骨髓造血功能旺盛,见于感染,急性中毒,急性溶血,急性失血等
22退行性左移是指核左移而白细胞总数不增高,甚至减低者,见于再生障碍性贫血,粒细胞减低症,严重感染
23中性粒细胞核分叶5叶以上者超过3%则称为核右移
24中性粒细胞核右移形成的原因是造血物质缺乏,脱氧核糖核酸减低,骨髓造血功能减退
25淋巴细胞数量减低常见于接触放射线,应用肾上腺皮质激素,促肾上腺皮质激素,严重化脓性感染
26外周血嗜酸性粒细胞浓度在d内有波动,白天低,夜间高,上午波动大,下午较恒定,与糖皮质激素脉冲式分泌有关
27Dohle小体是中性粒细胞胞质因毒性变而保留的嗜碱性区域,呈圆形,梨形或云雾状,界限不清,染成灰蓝色,直径~2um,亦可见于单核细胞
28巨多分叶核中性粒细胞的细胞体积较大,直径6~25um,核分叶常在5叶以上,甚至在0叶以上,核染色质疏松
29瑞氏染色中性分叶核粒细胞胞质呈浅紫红色
30瑞氏染色嗜碱性粒细胞胞质呈蓝黑色
3外周血小淋巴一般无颗粒,大淋巴细胞可有少量粗大,不均匀,深紫红色颗粒
32瑞氏染色单核细胞,直径0~20um,为外周血中最大的细胞
33异型淋巴细胞按其形态学特征分为3型:型(空泡型,浆细胞型),2型(不规则型,单核细胞型)3型(幼稚型)
34淋巴细胞受电离辐射后出现形态学改变:核固缩,核破碎,双核,卫星核淋巴细胞(胞质中主核旁出现小核)
35火焰状浆细胞见于IgA型骨髓瘤
血液分析仪及其临床应用
电阻抗法血液分析仪检测原理包括血细胞计数原理(库尔特原理),白细胞分类计数原理,血红蛋白测定原理三种
2根据电阻抗法原理,经溶血剂处理,脱水,不同体积的白细胞通过小孔时,脉冲大小不同,将体积为35~fl白细胞,分为个通道
3电阻抗法分析血液时,位于90~60fl单个核细胞区的细胞称为中间型细胞
4血液分析仪血红蛋白测定原理中,应在波长~nm下比色
5白细胞经过氧化物酶染色后,胞质内显示细胞化学反应,过氧化物酶活性为嗜酸性粒细胞中性粒细胞单核细胞,淋巴细胞核嗜碱性粒细胞无过氧化物酶活性,这是血液分析仪白细胞分类的基础
6正常白细胞直方图,在35~fl范围内将白细胞分为三群,左侧峰又高又陡为淋巴细胞峰
7正常白细胞直方图中,左右两峰间的谷较平坦,为单个核细胞峰
8在白细胞直方图中,淋巴细胞峰左侧区域异常的主要原因是有核红细胞,血小板凝集,巨大血小板,未溶解红细胞,疟原虫,冷凝集蛋白,脂类颗粒,异形淋巴细胞
9在白细胞直方图中,淋巴细胞峰右移,与单个核细胞峰左侧相连并抬高,主要原因是急性淋巴细胞白血病,慢性淋巴细胞白血病,异形淋巴细胞
0在白细胞直方图中,单个核细胞峰与中性粒细胞峰之间区域异常,主要原因是未成熟的中性粒细胞,异常细胞亚群,嗜酸性粒细胞增多
正常红细胞直方图,在36~fl范围内分布两个细胞群体,从50~25fl区域有一个两侧对称,较狭窄的曲线,为正常大小的细胞,从25~fl区域有另一个低而宽的曲线,为大红细胞,网织红细胞,当红细胞体积大小发生变化时,峰可左移或右移,或出现双峰
2正常血小板直方图,在2~30fl范围内分布,呈左偏态分布,集中分布于2~5fl内,当有大血小板或小红细胞,聚集血小板时,直方图显示异常
3ICSH分布的血液分析仪评价方案包括:可比性,准确性,总重复性,精密度,线性范围,携带污染
4精密度分为批内,批间两种精度。批内精度是对同一批样本重复测定结果的评价,批间精度是对两批或两批以上样本重复测定结果的评价
5红细胞血红蛋白分布宽度(HDW)是反映红细胞内Hb含量异质性的参数,用单个红细胞Hb含量的标准表示,正常参考范围24~34g/l
6血小板分布宽度是仪器测量一定数量血小板体积后,计算所得外周血血小板体积大小异质性参数
7血小板分布宽度减低见于反应性血小板增多症
8小细胞性贫血,当RDW正常时,红细胞主峰左移,分布在55~00fl,波峰在75fl处,基底较窄,为小细胞低色素均一性图形,见于轻型地中海贫血
9小细胞性贫血,当RDW轻度增高时,红细胞主峰左移,分布在55~00fl,波峰在65fl处,为小细胞低色素和细胞不均一性图形,见于缺铁性贫血
20正常细胞性贫血,当RDW轻度增高时,红细胞分布在44~20fl,波峰在80fl处,为红细胞不均一性图形,见于血红蛋白异常,骨髓纤维化
2正常细胞性贫血,当RDW明显增高时,红细胞分布在40~50fl,波峰在90fl处,为红细胞不均一性图形,见于早期或混合性营养不良
22患者,女,32岁,因乏力,面色苍白就诊,实验室全血细胞检查:RBC3.2,Hb88,WBC4.3,PLT00,RDW27.3%,MCV77,MCH35.5,MCHC,红细胞直方图显示:红细胞主峰左移,分布在55~00fl,波峰在65fl,血涂片红细胞体积小,大小不均,初步诊断为贫血,则最可能患缺铁性贫血。
知识点整理免疫学基本概念及其生物学功能;免疫:机体识别和排斥抗原性异物的一种生理功能免疫三大功能:免疫防御、免疫自稳、免疫监视中枢免疫器官(骨髓和胸腺)外周免疫器官(淋巴结、脾脏、扁桃体)免疫细胞:淋巴细胞(T,B,NK)、单核巨噬细胞、其他免疫应答细胞(中性粒、嗜酸性、嗜碱性和肥大细胞)免疫分子:免疫球蛋白(IgM,IgG,IgA,IgE,IgD),补体,细胞因子,细胞黏附分子,人类白细胞分化抗原免疫应答:机体免疫系统接受抗原刺激发生的一系列反应,并以排出或分解该抗原为目的的反应过程。过程:抗原的识别、处理、信息传递(识别阶段),免疫细胞的激活、增殖、分化(活化阶段)以及产生一系列的免疫效应因子(效应阶段)。临床免疫学检验:研究免疫学检测理论、技术、应用,免疫疾病发病机制、免疫诊断、及防治的一门医学领域的应用学科。免疫学检测技术的基础是抗原抗体反应,免疫学技术有凝集反应、沉淀反应、补体参与的反应、中和反应和标记免疫反应五种类型。免疫检验:)利用免疫检测原理和技术检测免疫活性细胞、抗原、抗体、补体、细胞因子、细胞黏附分子等免疫相关物质;2)体液中的微量物质如激素、酶、血浆微量蛋白、血液药物浓度、微量元素。临床免疫学:利用免疫学理论和技术研究疾病的免疫病理机制、诊断和鉴别诊断、疗效评价、预后判断和预防的多个分支学科的总称。免疫性疾病:各种原因引起的机体免疫应答异常所致的疾病,包括超敏反应性疾病、自身免疫病、免疫缺陷病和免疫增生病。感染免疫学:研究病原微生物与宿主相互关系从而控制感染的学科,传统免疫学核心。肿瘤免疫学:研究肿瘤免疫原性、机体抗肿瘤的免疫效应及机体的免疫功能与肿瘤发生、发展的相互关系以及肿瘤免疫诊断与防治的学科。移植免疫学:研究移植物与宿主相互关系从而选择移植物和延长移植物存活的学科。2血清学反应的概念;抗体主要存在于血清中,体外的抗原抗体反应称为血清学反应。抗原抗体反应:抗原与相应抗体在体内或体外发生的特异性结合反应,特异性取决于抗原表位和抗体超变区分子间的结构互补性与亲和性,并通过静电引力、范德华引力、氢键结合力和疏水作用力等非共价键结合在一起。3抗原抗体的反应原理Ag决定簇和Ab分子超变区分子间的结构互补性;分子表面特异的可逆的弱结合力;亲水胶体转化为疏水胶体*亲和力(affinity)是抗体分子上一个抗原结合点与对应抗原表位之间相互适应而存在的引力。这是抗原与抗体之间固有的结合力。*亲合力(avidity)是指反应系统中整个抗原分子与相应抗体之间的结合能力。亲和力与亲和性、抗体的结合价和抗原的抗原决定簇数目相关。亲和力越大,抗原抗体结合越牢固。K=抗原抗体复合物浓度/(游离抗原浓度*游离抗体浓度)K值大的抗体与抗原牢固结合,不易解离,说明该抗体有高亲和力。亲水胶体转化为疏水胶体:血清学反应条件下,抗原抗体均带负电荷,使极化的水分子在其周围形成水化层,成为亲水胶体。当抗原与抗体结合后,表面电荷减少,水化层变薄,失去亲水性能,抗原抗体复合物成为疏水胶体。电解质作用下,中和胶体表面电荷,使疏水胶体靠拢,形成可见的抗原抗体复合物。4抗原抗体反应的特点。特异性:抗原与抗体结合反应的专一性。分子基础:抗原表位与抗体分子高变区之间空间构型的互补性交叉反应:两种不同的抗原分子具有部分相同或类似结构的抗原表位,可与彼此相应的抗血清发生反应可逆性:解离后抗原抗体仍保持原有理化性质和生物活性。影响因素:抗体与抗原间的亲合力,亲合力越高,结合越牢固,越不易解离;环境因素-pH、离子强度比例性:抗原与抗体发生可见反应需遵循一定的量比关系。前带(prezone):抗体过量。后带(postzone):抗原过量。等价带(equivalencezone):抗原抗体比例合适阶段性:亲水胶体转疏水胶体的化学和物理变化过程:抗原抗体特异性结合(几秒至几分钟,不出现可见反应),非特异性促凝集(抗原-抗体复合物在适合温度pH电解质等环境因素影响下,进一步交联和聚集,出现肉眼可见沉淀、凝集、细胞溶解等反应,数分钟至数小时)【熟悉免疫学发展简史;抗原及免疫球蛋白的定义及功能5抗原抗体的反应影响因素。反应物自身因素:*抗原:.理化特性2.Ag决定簇数量3.Ag决定簇种类*抗体:.来源2.特异性与亲和力3.浓度环境条件:*电解质:0.85%NaCl*使[Ag-Ab]表面的电势下降,失去电荷,破坏水化层,形成凝集或沉淀。浓度过高出现盐析。酸碱度:pH6~9*酸凝集:当pH为3左右时,接近细菌Ag的等电点,可出现非特异性凝集。蛋白质具有两性电离性质,每种都有固定的等电点。反应液中pH过高或过低都可影响抗原或抗体的理化性质。温度:5~40℃,冷凝集为4℃。在一定范围内,温度增高,分子运动加快,反应速度加快,但结合不牢固,易解离;温度低,反应速度慢,但结合牢固。6抗原抗体反应的类型。沉淀反应;凝集反应;补体参与的反应;中和反应;免疫标记免疫原和抗体的制备(免疫原和抗血清的制备;单克隆抗体与基因工程)免疫原是诱导机体产生抗体并能与抗体发生反应的物质。半抗原是指仅有抗原性而无免疫原性的物质,与载体结合后可具有免疫原性。2特异性IgG抗体的纯化方法有盐析法、凝胶过滤法、离子交换层析法、亲和层析法等;制备单价特异性抗血清可采用亲和层析法和吸附剂方法。可溶性免疫原制备:粗提——组织匀浆制备,细胞的破碎2可溶性免疫原提纯:超速离心法,选择性沉淀法,凝胶层析法,离子交换层析法,亲和层析法,电泳法多克隆抗体的概念由多种抗原决定簇刺激多株B细胞增殖分化所产生的抗体,是多种抗体的混合物。抗血清是经过抗原免疫的动物血清。在含有多种抗原表位的抗原刺激下,体内多个B细胞克隆被激活并产生针对多种不同表位的抗体,其混合物为多克隆抗体。2多克隆抗体的制备流程;免疫原(及佐剂)的制备;免疫动物(动物选择和动物免疫);试血;采血收集血清;抗血清的鉴定;抗血清的纯化;抗血清的保存3免疫佐剂的概念、常见种类及作用机制。免疫佐剂是先于抗原或与抗原一起注入机体,可增强机体对该抗原的特异性免疫应答或改变免疫应答类型的物质。氢氧化铝,明矾,弗氏佐剂(Freundadjuvant),脂质体,细胞因子(乳化方式:研磨法:易乳化,但抗原或佐剂用量大。搅拌混合法:无菌操作,节省抗原或佐剂,但不易乳化完全)作用机制:.改变抗原的物理性状,使抗原在体内滞留或延缓释放,延长抗原与免疫细胞作用的时间,从而增强抗原免疫原性。2.抗原在佐剂的辅助作用下,更易被巨噬细胞有效吞噬和有效的加工处理和呈递。3.刺激单核-巨噬细胞活化,释放细胞因子调节和增强淋巴细胞的应答能力。4.刺激淋巴细胞增生分化,从而增强和扩大免疫应答能力。应用佐剂的缺点:佐剂常混有微量其它物质,这些物质进入体内后也可引起抗体的产主,影响抗血清的特异性;注射佐剂可引起局部形成肉芽肿和无菌性脓肿;反复注射,易发生超敏反应,使局部组织坏死,甚至引起动物死亡。4免疫血清制备动物的选择.抗原与免疫动物种属差异越远越好;2.动物个体选择:适龄、健壮、无感染正常动物、体重合乎要求;3.抗原性质:酶类—豚鼠;甾体激素—家兔 4.血清用途:R型:等价带宽,适于诊断试剂.用家兔免疫产生.H型:等价带窄,适于免疫治疗.用马免疫产生.5.抗血清需要量选择免疫方法.免疫剂量:)不能过大或过小,否则产生免疫耐受;2)首次免疫剂量不宜过大3)大:0.5-mg/只小:0.-0.6mg/只免疫途径:)皮内或皮下注射:a.采用多点注射(8-0点); b.半抗原宜皮内多点注射; c.皮内注射易引起细胞反应,对提高抗体效价有利,但皮内注射较困难(因佐剂加入后粘度大)。2)腹腔和静脉注射: 多用于颗粒性抗原和加强免疫。3)淋巴结内注射: 适宜于微量抗原(先用完全佐剂在足掌作基础免疫)。免疫时间:)间隔约0-20天(宜长、否则导致免疫耐受);2)二次以后每次间隔7~0天(过长→刺激变弱→抗体效价不高。)3)一般接种5-8次,不超过2个月;4)半抗原的免疫间隔要求较长(30~40天)。如8次免疫后仍不产生抗体,则应更换动物。采血及试血颈动脉采血法:家兔、绵羊、山羊;心脏采血法:家兔、豚鼠、大鼠、鸡;静脉采血法:家兔、山羊、绵羊免疫血清的纯化:免疫血清是成分复杂的混合物,除有特异性和非特异性抗体,还有各种蛋白成分抗血清——硫酸铵盐析多次(粗提)——亲和层析,离子交换层析,凝胶过滤——IgG类抗体(不纯)——亲和层析,吸附法——特异性IgG抗体抗体的鉴定:.效价的鉴定:抗体含量测定。根据抗原性质不同,颗粒性抗原可采用凝集试验。可溶性抗原常用免疫双扩散法2抗体的纯度鉴定:SDS-PAGE。若只出现一条蛋白电泳区带说明抗体纯化已达到要求,而出现多条蛋白区带则表明抗血清中混有杂蛋白,必须进一步纯化。3.特异性鉴定:抗体对相应或相似抗原识别能力一般用特异性抗原及其相似的抗原与待鉴定抗体进行免疫双扩散试验。如果出现交叉反应,说明有杂抗体存在。可应用相应抗原吸收杂抗体,即可得到单价特异性抗体。4抗体亲和力鉴定:亲和力高则灵敏度好:亲和力测定主要有平衡透析法、酶联免疫法和放射分析法。亲和力的高低是由抗原分子和抗体分子的结合位点、抗原决定簇之间立体构型的合适度决定的。免疫血清的保存:.4℃保存:可保存3~6个月2.低温保存:-20~-40℃,可保存2~3年。抗体的保存浓度为20~30mg/ml为宜,加入/的硫柳汞或/的叠氮钠防腐,并加入等体积的中性甘油,分装小瓶,置-20℃以下低温保存。3.冰冻干燥保存:可保存5~0年4单克隆抗体的概念每一克隆B细胞所产生的理化性状高度均一、组成均一、只与同一种抗原决定族反应的抗体。5淋巴杂交瘤技术的基本原理杂交瘤技术:在细胞融合技术的基础上,将具有分泌特异性抗体能力的致敏B细胞和具有无限繁殖能力的骨髓瘤细胞融合为B细胞杂交瘤。6单克隆抗体的制备流程、亲本细胞的选择(骨髓瘤细胞:BALB/C小鼠骨髓瘤NS-细胞株和SP2/0细胞株,致敏B细胞:免疫脾细胞,每次抗原用量00μg)2、细胞融合(细胞融合剂——PEG种类:分子量、、4的PEG是最常用的细胞融合剂;作用机理:诱导细胞膜上脂类物质结构重排,使细胞膜易打开而有助于细胞融合;作用特点:随机发生的,不同厂商、批号、分子量的PEG,其纯度与毒性有所不同。)3、杂交瘤细胞的选择性培养基,筛选与克隆化3凝集反应凝集反应的原理及特点;定义:细菌和红细胞等颗粒性抗原或表面包被抗原的颗粒性载体与相应抗体结合后,可出现肉眼可见的凝集现象。概念:颗粒性抗原+相应抗体↓(适量电解质)凝集现象,可溶性抗原(或抗体)+载体颗粒↓致敏颗粒+相应抗体(或抗原)↓(适量电解质)凝集现象特点:.抗原为颗粒性抗原或可溶性抗原致敏颗粒;2.反应时间较短,需几到十几分钟;3.反应产物为凝集块;4.凝集反应抗原分子大,反应面积小,为使抗体分子不致过多,试验时需稀释抗体。2常见的直接凝集反应;直接凝集试验:颗粒性抗原在有电解质的参与下,直接与相应抗体结合出现的凝集现象。凝集原(agglutinogen):凝集反应中的抗原凝集素(agglutinin):凝集参与反应的抗体分类:玻片凝集实验(将已知抗体与待测颗粒抗原直接低价在玻片上,混匀并在室温下反应数分钟,用肉眼或低倍镜观察有无凝集现象,出现颗粒凝集的为阳性反应。方法评价:简便、快速;定性检测方法; 但敏感性较低。临床应用:主要用于菌种鉴定和血清学分型,也可检测病人血清中有无相应的抗体;用于人类ABO血型鉴定。),试管凝集实验(颗粒性抗原(如细菌或红细胞等)与相应抗体在试管中直接结合,在一定条件下,出现肉眼可见的凝集现象。方法评价:经典的半定量试验;敏感性不高;干扰因素多,影响特异性;操作较简单。临床应用:用已知抗原测定血清中有无相应抗体及其含量,辅助临床诊断疾病或流行病学调查。如外斐试验、肥达试验、交叉配血试验。)3间接凝集反应的分类及常见试验。间接凝集试验:将可溶性抗原(或抗体)吸附或偶联于载体上,使之成为致敏载体颗粒,再与相应抗体(或抗原)作用,在适宜电解质的参与下,出现的凝集现象。载体(carrier):试验体系中与免疫无关的颗粒。致敏:抗原(或抗体)偶联于颗粒表面的过程。致敏颗粒(sensitizedparticle):吸附有已知抗原或抗体的颗粒。(正向间接凝集反应:用抗原致敏载体,检测标本中有无相应抗体。先将可溶性抗原结合与载体颗粒,然后与待测标本中的抗体反应,出现肉眼可见凝集颗粒或块。反向简洁凝集反应:用特异性抗体致敏载体,检测标本中有无相应抗原。简洁凝集抑制反应:用抗原致敏载体,联合相应抗体检测标本中是否存在于致敏抗原相同的抗原。协同凝集反应:金黄色葡萄球菌的细胞壁中含有A蛋白(staphylococcusproteinA,SPA),SPA具有与IgG的Fc段结合的特性,利用该特性与IgG抗体相连制成抗体致敏的颗粒载体,当它与相应抗原反应时出现的凝集现象即叫协同凝集试验。类风湿因子检测:原理::类风湿因子(rheumatoidfactorRF)是由于细菌、病毒等感染因子,引起体内产生的以变性IgG(一种抗体)为抗原的一种自身抗体。IgM型为主要类型.IgG吸附于聚苯乙烯胶乳颗粒上作为检测试剂,在反应介质中,待检血清中如含有RF,可与胶乳颗粒出现凝集反应。操作步骤::在3块载玻片上分别加一滴RF阳性血清、RF阴性血清及待检血清;加一滴IgG致敏的胶乳于各血清样品中,轻微晃动载玻片混匀.;min后观察凝集反应发生情况.注意事项:器材要洁净、血清要新鲜、以确保结果可靠.;注意阴性、阳性对照的设立.;注意血清及致敏胶乳加样量的比例.)红细胞为载体:间接血凝试验(可溶性抗原吸附于人O型红细胞或绵羊、家兔红细胞上,制备成抗原致敏的红细胞,然后与相应抗体作用,在有电解质存在的条件下,作用一定时间后可出现肉眼可见的红细胞凝集现象。方法评价:敏感性高于直接凝集试验和胶乳凝集试验;操作简便易行、快速、成本低廉。)聚苯乙烯胶乳微粒为载体:胶乳凝集试验间接凝集反应特点:敏感、快速、操作简便、不需特殊仪器;检测范围广(各种抗体和可溶性抗原)。敏感性比直接凝集反应高。间接凝集反应应用:抗原的检测:抗体的检测:感染性疾病、自身免疫性疾病、变态反应性疾病。4抗球蛋白试验原理及应用;利用抗球蛋白抗体作为第二抗体起桥联作用,链接与红细胞表面抗原结合的特异抗体,使红细胞凝集,用于检测抗红细胞不完全抗体。直接Coombs试验:新生儿溶血症,自身免疫性溶血症,特发性自身免疫性贫血(患者红细胞上不完全抗体)间接Coombs试验:检测母体Rh(D)抗体,红细胞不相容输血后产生的血型抗体测定(血清中游离的不完全抗体)由于不完全抗体只能与一个RBC的决定簇结合,而不能同时与两个RBC的决定簇结合,而抗球蛋白抗体作为第二抗体可达到连接与RBC表面抗原结合的特异性抗体,使RBC凝集。针对于不完全抗体(IgG抗体)的检测。4沉淀反应0沉淀反应沉淀反应是指可溶性抗原与相应抗体在适当条件下发生特异性结合而出的沉淀现象.根据沉淀反应介质和检测方法的不同,将其分为液体内沉淀试验、凝胶内沉淀试验和凝胶免疫电泳试验三大基本类型。免疫浊法度测定为液体内沉淀试验;单向扩散试验平板法是一种定量的凝胶内沉淀试验,免疫电泳技术是电泳分析与沉淀反应的结合产物,常见的有对流免疫电泳、火箭免疫电泳、免疫电泳、免疫固定电泳等。6抗原性质分析出现哪三种结果现象?结果解释?形成的沉淀可出现:相吻、相交、相切三种现象解释:互相吻合相连:抗体与两种抗原中的相同表位结合形成沉淀,但不能说明两种抗原完全相同相交:两种抗原完全不同相切:两种抗原部分相同5放射免疫技术:5生物素-亲和素系统特点,相关酶免疫技术原理【BAS特点:特异性高,灵敏度高(亲和素同时与4个生物素分子结合,以及生物分子抗原或抗体可结合多个生物素分子产生级联放大效应),稳定性强(不可逆反应,抗酸碱能力强),实用性强(可与多种示踪物质如酶、荧光素、铁蛋白、放射性核素等联合用于抗原-抗体、配体-受体、核酸杂交等多种生物学反应体系,也可作为亲合介质用于上述反应物的分离、纯化。)。【BAB法:以标记生物素分子为特点,以游离亲合素为桥,借助生物素化抗体连接抗原-抗体系统,借助生物素化酶连接信号检测系统。以游离亲和素剧中,分别连接生物素化大分子反应体系和标记生物素。【LAB法:以标记亲和素为特点,将示踪物质(酶,荧光素)标记在亲和素分子上,借助生物素化抗体再与抗原-抗体系统进行偶联。【ABC法:预先按一定比例将亲和素与生物素标记示踪物质混合,形成可溶性的亲和素-生物素化酶标复合物,同时确保预留一定位点再与生物素化的抗体结合,与抗原-抗体系统进行偶联。
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