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免疫学检查有哪些

　　1.结核病的特异性抗体：在结核性浆膜腔积液中存在特异性IGG抗体，常用ELISA法或ABC-ELISA法检测，由于各试剂盒选用抗原不同，如结核杆菌化蛋白衍生物或结核分支杆菌抗原等，检测方法差异造成结果的敏感性和特异性也不同，一般认为用Ag5作抗原最佳。近年来用聚合酶链反应检测积液中结核杆菌DNA，是目前最敏感的特异性检查方法，但应注意由于污染而造成的假阳性。

　　2.肿瘤标志物

　　（1）癌胚抗原（CEA）：CEA是一种分子量较大的糖蛋白，当积液中CEA20μg/L，积液CEA/血清CEA比值1时，应高度怀疑为癌性积液。有时强调胸水CEA/血清CEA比值4.3是恶性病变的一个指标。

　　（2）甲胎蛋白（AFP）：血清AFP作为原发性肝癌的标志物现已肯定。同样腹水中AFP检测结果与血清AFP呈正相关。检测腹水中AFP25μg/L时对诊断原发性肝癌引起的腹水也是有价值的。

　　（3）CA：腹水中CA升高常作为卵巢癌转移的指标，棱敏感性为85%，特异性可达95%.

　　近来人有人提出用浆膜腔积液检测鳞状细胞癌抗原组织多肽抗原、CA19-9及CA72-4，分别对扁平上皮细胞癌、原发性肺癌、胰腺癌及结肠癌的有诊断参考价值。

　　3.其它

　　（1）T细胞亚群：结核性胸水中以淋巴细胞为主早期以中性粒T细胞增加明显，T细胞中又以T4为主，T4/T8比值升高为3.22±1.63.T4细胞的绝对值数与积液的量呈负相关，积液中T3T4的百化数及绝对值数都高于自身外周血。而癌性积液的T细胞虽增加，但低于结核性积液中T3T4的细胞数，并分别低于自身外周血，因此检测T细胞亚群也可用为鉴别结核性和癌性积液的参考指标。

　　（2）γ-干扰素（γ-IEN）：结核性浆膜腔积液中γ-IFN含量升高，平均为91U/ml，且肺部受损较无肺部受损者高，积液量多者较少者高，而其它性质的胸农会积液γ-IFN含量均低于2U/ml，由此看来胸腔积液γ-IFN含量的检测对结核性胸膜炎的鉴别诊断是一项参考指标。

　　（3）肿瘤坏死因子（TNF）：用RIA法检测结核性胸腔积液及血液中TNF含量结果积液中TNF平均含量为ng/L（-ng/L）。其自身血清TNF含量为ng/L（0-ng/L）。TNF含量与治疗无关。而非结核性胸膜积液TNF含量为62ng/L，明显低于结核性积液。因此测定TNF含量有助于结核怀胸膜炎的鉴别诊断。

　　其它还有非特异性免疫复合物检查，一般认为渗出液的免疫复合物比漏出液高，其IC浓度高低常与方法有关。应重视风湿病及系统怀红斑狼疮患者胸水及血清IC的浓度，它们的IC浓度高于血清浓度，而其他疾病时血清IC浓度则高于胸水。在红斑狼疮引起的胸腔积液时，抗核体滴度会升高补全下降。风湿病引起胸腔积液中类风湿因子将近价多数1：，而且积液中RF将近价高于血清，可作为诊断类见湿病性胸腔积液的依据。

点彩虹细胞临床意义

　　某些重金属中毒时，胞质中残存的嗜碱性物质RNA变性沉淀而形成，用瑞特染色，可见红细胞的粉红胞质中含有粗细不等的蓝黑色颗粒，如用碱性美蓝染色法，则点彩红细胞的胞质呈淡牙绿色，而颗粒为深蓝色，色泽鲜明，易于识别。

　　操作时用油镜按网织红细胞计数法，计数个红细胞中，所见点彩红细胞数，然后除以，即为碱性点彩红细胞的百分率。

　　由于点彩红细胞较少，分布不匀，有人用扩大计数面积的办法计数，这比只数个红细胞准确，可选择分而均匀区域，数50个视野中点彩红细胞数，然后计数5个视野内红细胞总数，再按下式求出点彩红细胞占有比值。

　　点彩红细胞理有比值（百分率）=50个神野内点彩红细胞数/5个视野内红细胞总数×10

　　注意：必须选择红细胞分布均匀的区域计数。

　　[参考值]不超过3×10-4或0.

　　[临床意义]点彩红细胞明显增多可见于铅、汞、硝基苯、苯胺等中毒病人。此外，溶血性贫血、巨幼细胞性贫血、白血病、恶性肿瘤等也可见增多。

浆膜腔积液微生物学检查介绍

　　如标本通过一般性状，显微镜信化学检查已肯定为漏出游入，一般则无检查细菌的必要，如肯定为或疑为渗出液，则应经无菌操作离心沉淀，取沉淀物作细菌培养及涂片染色检查，作为涂片革兰氏染色时应用油镜仔细观察，如见有细菌或真应及时报告临床医师，细菌检验必须认真负责，因细菌感染的胸膜炎可同时由多种细菌引起的，医院报告份腹水培养阳性率占24.6%，共分离细菌株，其中只分到一株的占39%，同时分离两株的为21%，三株的为16%，四株的为8%，五株的以上占有16%。这些细菌中以脆弱的类杆菌属、大肠埃希菌、粪肠球菌、铜绿假单胞菌占半数之多。应从实验室角度分清主次。一量培养阳性应敏感试验供试验临床用药参考。

单核细胞的生理作用

　　骨髓多功能造血干细胞分化为髓系干细胞和粒-单系祖细胞，而后发育为原单核细胞，幼单核细胞及单核细胞，释放至外周血中单核细胞，大部分粘附于血管壁，少数随血液循环，在血中停留3～6d后即进入组织或体腔内，转变为幼吞噬细胞，再成熟为吞噬细胞，寿命可达2～3个月。单核-巨噬细胞具有吞噬病原体功能（如病毒、原虫、真菌、结核杆菌等）、吞噬和清理功能（如组织碎片、衰老血细胞、抗原抗体复合物、凝血因子等）、吞噬抗原传递免疫信息功能，还参与杀菌、免疫和抗肿瘤作用。

非上皮细胞成分

　　涂片中脱落的非上皮细胞成分又称背景成分。包括血细胞、粘液、坏死物及异特等。

　　1.红细胞涂片中可见到多少不等的红细胞。因红细胞大小较恒定，可作为测定其他细胞大小的标尺。红细胞量的多少与病变性质或取材时局部损伤程度有关。

　　2.中性粒细胞涂片中常可见多量中性粒细胞。中性粒细胞易变性，胞质溶解而成裸核。主要见于组织炎症时。此外见于癌组织坏死后继发感染时。

　　3.嗜酸性粒细胞其存在与炎症、变态反应或寄生虫感染有关。

　　4.淋巴细胞见于炎症，特别是慢性炎症时较多。

　　5.浆细胞慢性炎症病灶中多见。

　　6.巨噬细胞涂片中一般不太多，相当于血液中的单核细胞，有很强的吞噬作用。

　　7.组织细胞比巨噬细胞略小。核染色较深，呈圆形，位中或偏位，见于炎症时。

　　8.多核巨细胞：细胞体积大，可含数十个胞核，若在涂片中见到，则要考虑结核病的可能。

　　9.坏死物：HE染色为红染无结构颗粒状物，淫片中若出现坏死物质，首先应考虑癌的可能，在癌性坏死物中或其周边部常可见到残存固缩的癌细胞核。其次考虑为结核，其坏死彻底，周边部可发现多核巨细胞或上皮样细胞。

　　此外淫片中还可见到粘液、细菌团、真菌、植物细胞、染料沉渣和棉花纤维等。

上皮细胞的一般形态变化

　　上皮细胞在不同的炎症时反应亦不同。急性炎症时，上皮细胞主在表现为退化变性和坏死。慢性炎症时则主要表现炎坟生、再生和化生、并有不同程度的退化变性。

　　1.鳞状上皮细胞：炎症时基底层和中层细胞的改变较为明显，主要是细胞核的改变，有时细胞形态也有一定程度的改变。

　　（1）细胞核：核体积增大，比正常细胞核大1倍左右，胆细胞体积不变，所经有轻度的核与胞策比例失常。由于细胞核仍为圆形或卵圆形，染色质颗粒细胞分布均匀，与癌细胞不同。当细胞生长活跃时，细胞核呈轻度异形，不规则，有皱褶，染色质略增多，染色较正常略深，核肥大和异菜是炎症所致细胞增生，生长活跃的表现。此外尚见核固缩、核碎裂等细胞退变和坏死表现。

　　（2）细胞形态：炎症时，鳞状上皮细胞形态偶尔发生明显变异，如呈蝌蚪状、梭形、星形或不规则形，但胞核改变不蝗显或轻度增大，深染和畸形。此类细胞被称为异形细胞可能是柱状上皮细胞的鳞状化生。涂片中常见到增生的底层细胞和中层细胞团，其细胞核可有轻度畸形，染色略深，但大多数细胞核形态、大小、染色均属正常范围。

　　2.柱状上皮细胞：炎症时，纤毛柱状上皮细胞改变较明显的，常成处开成排脱落，细胞经固缩退变不主。

　　（1）细胞核：发生固缩性退变，胞核体积缩小，核形轻度不规则，油印变深，有的为正常细胞核的一半大小，此外可见含2个核以上的多核重叠状。

　　（2）细胞形态：细胞体积缩小，呈小锥形，胞质呈深红染色。

　　（3.病毒感染所致上皮细胞形态改变，与脱落细胞学检查有关的病毒感染性疾病主要在呼吸道、阴道和泌尿道。巨细胞病毒感染的细胞内出现包涵出现包涵体对细胞学检查有诊断意义。单纯疱疹病毒感染后，上皮细胞核发生明显改变，易被误诊为癌细胞。

　　（1）单纯疱疹病毒感染：单纯疱疹病毒分为Ⅰ型和Ⅱ型。Ⅰ型主要经口及呼吸道传播，Ⅱ型通过性器官传播，女性生殖器感染好发部位是宫颈和阴道上部，主要累及鳞状上皮，可能与宫颈癌的发生有关，涂片中疾病早期，鳞状细胞核中度至重度肿大，呈弱嗜好碱性，不透明，毛玻璃样，偶见胞质核呈空疱状，有时可见多核巨细胞形成，胞核中心可见嗜酸性包涵体，包涵体周围是亮晕，核边清楚。最后病变细胞发生变性，电镜证实核内包涵全由单纯疱疹病毒颗粒组成，胞质内也可见到核病毒包涵体。

　　（2）巨细胞病毒感染：主要感染婴儿。全身各主要器官均可受累，常见器官为唾遥、肺、肝、肠、肾、膀胱、脑等。

　　细胞学检查可见脱落的肺泡上皮细胞、支气管纤毛柱状上皮细胞或肾小管上皮细胞体积增大，直径达20-40μm，胞核或胞质内出现嗜酸性包涵体。核内包涵体体积巨大，直径达8-10μm，包涵体周围有沉晕。胞质内包涵体体积较小，可含一个或数个，包涵体周围也有亮晕。电镜证实包涵体由巨细胞病毒颗粒组成。

血型鉴定操作时的注意内容

　　①虽然，IgM抗A和抗B与相应红细胞的反应温度以4℃最强，但为了防止冷凝集现象干扰，一般在室温20℃～24℃内进行试验，而37℃条件，可使反应减弱。

　　②所用器材必须干燥清洁、防止溶血，凝集和溶血的意义一样。为避免交叉污染，建议使用一次性器材。标准血清从冰箱取出后，应待其平衡至室温后再用，用毕后应尽快放回冰箱保存。

　　③加试剂顺序：一般先加血清，然后再加红细胞悬液，以便核实是否漏加血清。

　　④幼儿红细胞抗原未发育完全、老年体弱者抗原性较弱，最好采用试管法鉴定血型。

　　⑤玻片法反应时间不能少于10min，否则较弱凝集不能出现，造成假阴性。

　　⑥正、反定型结果一致才可发报告。反定型法：先天性免疫球蛋白缺陷，长期大量应用免疫抑制，血型抗体可减弱或消失；血清中存在自身免疫性抗体、冷凝集素效价增高、多发性骨髓瘤、免疫球蛋白异常均可造成反定型困难；新生儿体内可存在母亲输送的血型抗体，且自身血型抗体效价又低，因而出生6个月以内的婴儿不宜做反定型。老年人血清中抗体水平大幅度下降或被检者血清中缺乏抗A及（或）抗B抗体，可引起假阴性或血型鉴定错误。

标本的采集原则及处理原则

　　采集原则

　　①在最适宜的时间收集标本，最好在使用抗生素之前或感染急性期采集。

　　②采集标本要有代表性和针对性，不同情况应区别对待，适宜地采取相应的方法收集标本，如尿液标本疑为厌氧菌感染时，应行耻骨上缘穿刺术取膀胱尿培养。

　　③采集标本必须来自实际感染的部位，严格无菌操作尽可能避免外源性污染。

　　④收集标本应当使用合适的收集器材、容器和培养基，以保证最大限度的发现微生物。

　　⑤标本采集、运送过程中要有专人负责，避免人为操作失误。

　　⑥采集标本不仅要防止被污染，同时也要注意安全，防止传播和自身感染。

　　处理原则

　　一些对环境敏感的细菌如脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌和流感嗜血杆菌等应保温并立即送检，而其他所有的标本采集后最好在2h之内送到实验室。若不能及时送检，标本应置于一定环境中保存，如尸检组织、支气管洗液、心包液、痰、尿等标本应保存在4℃环境中。脑脊液、滑膜液等则要在25℃保存。一般情况下，用于细菌培养的标本保存时间不应超过24h。

　　厌氧性标本应放在专门的运送瓶或试管内运送，有时可直接用抽取标本的注射器送。

β珠蛋白生成障碍性贫血分型

　　重型：（纯合子）又称库理（Cooley）贫血，患儿出生6个月后逐渐出现症状，皮肤苍白、黄疸，肌张力松弛，有发热和消化不良，肝、脾肿大，腹部膨隆。病程日久因长期骨髓增生，骨髓生长出现畸形如颅骨隆凸、额骨高起、上颚突出、鼻梁凹陷、两眼眼距增宽，呈特殊的地中海贫血外貌。由于发育障碍，患儿体形矮小。本型病情较重，常因贫血严重而并发心力衰竭，很难活至青春发育期，需反覆输血才能维持生命。患儿抵抗力降低，易被感染，亦易并发含铁血黄素沉着症。

　　中间型：其临床表现虽相同，但其基因型可以多样的，多属珠蛋白生成障碍性贫血亚型的纯合子或系β珠蛋白生成障碍性贫血基因与另一亚型基因结合的双重杂合子。临床表现，界于重型和轻型之间。多于4—5岁发病，症状与重型相似而稍轻。长期不输血或少量输血可维持生命，且生长发育较好，可活至青春期以但若受感染或接触有害物质，则易引起严重贫血。

　　轻型：（杂合子）多无症状，常于普查或家系调查中发现。少数呈轻度贫血，易误诊为缺铁性贫血。若贫血较显著，可见脾稍大。本型易与缺铁性贫血并存（如双胎儿、早产儿或钩虫感染等）而使贫血加重，致诊断混乱，应注意加以分析。血红蛋白E复合β珠蛋白生成障碍性贫血：系血红蛋白E与β珠蛋白生成障碍性贫血基因结合的双重杂合子。临床表现与血液学检查和重型或中间型珠蛋白生成障碍性贫血相似。家系调查，患儿父母的一方为血红蛋白E杂合子，另一方为β珠蛋白生成障碍性贫血杂合子。

抗原的分类介绍

　　天然抗原

　　根据抗原性物质与机体的亲缘关系可分为“自己”（self）与“非已”（non-self）抗原。即与机体种系发生关系愈远，其遗传性差异越大，其免疫原性也愈强。

　　人工抗原

　　用化学合成法或基因重组法制备含有已知化学结构决定簇的抗原，称之为人工抗原。它可包括人工结合抗原、人工合成抗原和基因重组抗原。无论对免疫学理论研究和分子疫苗的制备都具有重要意义。

　　胸腺依赖抗原与胸腺非依赖抗原

　　实验证明，由抗原激发的免疫应答是多细胞相互作用的结果，即由抗原呈递细胞、T细胞和B细胞共同参与完成的。大多数抗原激发的体液免疫应答，必须有TH细胞参予才能完成，称这种抗原为胸腺依赖抗原（thymus-dependentantigen，TDAg）。但也有少数抗原物质，不须TH细胞参予，可单独刺激B细胞产生抗体，称这种抗原为胸腺非依赖抗原（thymusindependentantigen，TIAg）。这二种抗原的区别主要在于其抗原决定簇的结构不同所致。TD抗原在其分子结构上，既具有载体功能的决定簇，也具有抗原性决定簇。且在其分子表面出现多种不同抗原决定簇，但缺乏重复出现的同一决定簇，TD抗原主要是大分子蛋白质。而TI抗原多数为大分子多聚体，带有重复出现的同一抗原决定簇，且降解缓慢，故不须TH参加即能直接刺激B细胞，TI抗原主要是多糖类物质。

　　超抗原

　　超抗原（supperantigen，Sag）是一类由细菌外毒素和逆转录病毒蛋白构成的抗原性物质。它们能与多数T细胞结合并为T细胞活化提供信号。而上述的普通抗原只能与少数对应T细胞结合并使之活化。因此称这种能与多数T细胞结合的抗原为超抗原。

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编辑：医学姐

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